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饲喂赛克灵对鲫鱼生长、饲料系数、非特异性免疫力及肠道菌群结构的影响

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发布日期:2017-05-20    浏览:118
  饲喂赛克灵Saccharomyces cerevisiae J8734对鲫鱼Carassius auratus生长、饲料系数、非特异性免疫力及肠道菌群结构的影响
  何夙旭1,万全2,毛玮,杨严鸥,曹雅男,姚峰,周志刚
  1 中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点开放实验室,北京 100081
  2 安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥 230036
 
  赛克灵是利用天然活性酵母Saccharomyces cerevisiae J8734经过一系列特殊发酵和加工工艺生产的酵母培养物,由活酵母细胞、细胞外代谢产物、变性培养基等物质构成。畜禽饲喂实验表明:赛克灵主要通过向动物胃肠道微生物提供营养,刺激有益微生物生长、抑制有害微生物生长,调控胃肠道微生态,从而提高机体免疫能力,提高消化吸收能力,能有效提高动物生产性能和健康状态。本实验室通过研究饲喂赛克灵对鲫鱼Carassius auratus生长、饲料系数、非特异性免疫力及肠道菌群结构的影响,拟强化赛克灵在水产饲料板块的推广应用。
  1 材料与方法
  1.1试验用鱼、饵料及饲养设备
  鲫鱼(Carassius auratus)为当年鱼种,取自安徽省合肥市丙子渔场,在实验室循环水水族箱内暂养2周,养殖系统位于安徽省合肥市,暂养料为试验基础饲料,自行配制,配方及化学组成见表1。试验饲料4种,在基础饲料中加入不同来源及用量的酵母培养物,其中赛克灵及其同类产品均由北京中科润之农业科技有限公司提供,配方见表2,饲料原料均通过合格检验。饲料通过颗料机制成直径3mm颗料,风干,碾碎过筛,塑料袋密封室内保存待用。
  循环水养鱼系统包括16只单个体积为60 cm×60 cm × 60 cm的塑料水族箱。水源为曝气自来水,使用沸石、活性炭净化水体,真空泵提水,每箱的循环水量为1.5L/min,箱内放置一颗散气石,以通风管连接罗茨鼓风机充氧。养殖期间养殖箱内水体溶氧>6mg O2/L,氨氮<0.2mg/L,PH6.5-7.2 ,水温25 ± 0.5°C,加热棒调控。日光灯提供光照,时间为8:30-20:00。
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       1.2试验步骤
  试验开始前,将鱼饥饿24h,再随机取样称重,初始体重见表3。每一饲料含4个平行水族箱,4种饲料共16箱,每箱放入23尾鱼,试验持续56d,每天于9:00和16:00各过量投喂饲料一次,1.5hr后回收残饵,70°C烘干。残饵量通过饲料溶失率校正。测定溶失率时,随机在3只无鱼的缸中各放入1份已称重的饲料,1hr后回收,70°C 烘干至恒重后称重。
  试验结束时,将鱼饥饿24hr后称量每缸鱼的总重,再从每缸中随机取样5尾,测量每尾鱼的体长、体高、背厚、内脏重及肝胰腺重;尾动脉取血,以2000-3000 r/min离心20 min,取上层血清备用;无菌条件下剖取每尾鱼完整肠道,冰浴保存24hr内运至中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点开放实验室,按He et al. (2009)运用16S v3 rDNA 梯度凝胶电泳技术(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis, DGGE)鉴定肠道壁菌群结构并比较分析。
  1.3 溶菌酶及补体测定
  测定血清的溶菌酶活性以及补体3和补体4含量。溶菌酶使用南京建成生物工程研究所试剂盒测定(比浊法),补体使用上海江莱生物科技有限公司剂盒测定(ELasa法),测定方法参照试剂盒说明书。
  1.4 结果计算
  试验按Zhou等(2003)方法分析饲料中干物质、粗蛋白及能量含量。实验统计指标如下:
  IBW(g):初始体重;
  FBW(g):终末体重;
  WG (%):鱼体增重 (%)=100×(终末体重-初始体重)/初始体重;
  SGR (%/d) :特定生长率 (%/d)=100×ln(终末体重/初始体重)/天数;
  FCR:饲料系数=摄食量 (g) /鱼体增重 (g) ;
  BI (mg/cm3) :肥满度 (mg/cm3)=体重 (mg)/ [体长 (cm) ×体高(cm)×背厚(cm)];
  SI (%): 屠宰率 (%)= 100×躯壳重 (g)/体重 (g);
  HSI (%):肝胰腺指数 (%)=100×肝胰腺重 (g)/体重 (g);
  免疫指标及肠道菌群分析,参见He et al. (2009);
  单因子方差分析,Duncan’s 多重比较, p<0.05即表示差异显著。
   2  结果
  饲喂赛克灵对鲫鱼生长及饲料利用的影响见表3,其中B(赛克灵2g/kg)及D(同类产品3g/kg)组的增重率显著性高于A组(对照组,p<0.05),以B组的优势最为明显,而赛克灵3g/kg(C组)增重率与对照组无明显差异(p>0.05);饲料系数B组明显低于对照A组(p<0.05),而C组、D组与对照A组无显著性差异(p>0.05)。本研究表明赛克灵2g/kg对鲫鱼促长最为显著。
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  饲喂赛克灵对鲫鱼肥满度、屠宰率及肝胰腺指数的影响见表4,各组之间屠宰率与肝胰腺指数无明显差异(p>0.05),而B(赛克灵2g/kg)组的肥满度显著性高于A组(对照组,p<0.05),而C组、D组与A组无显著性差异(p>0.05)。本研究表明赛克灵2g/kg显著提高鲫鱼肥满度。
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   饲喂赛克灵对鲫鱼非特异性免疫力见表5,各组之间溶菌酶、补体C3及C4水平无明显差异(p>0.05),但饲喂赛克灵及同类产品在一定程度上提高了补体C3的水平,本研究中酵母培养物未能显著提高鱼体非特异性免疫力可能与养殖环境有关。
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  饲喂赛克灵对鲫鱼肠道定植菌群的影响见图1、2及表5。不同饲喂组菌群结构差异显著(图2),其中赛克灵2g/kg及3g/kg与对照组更相近。饲喂赛克灵2g/kg显著(P<0.20)降低了不动杆菌Acinetobacter sp. (EU260174.1)、不动杆菌Acinetobacter sp. (HQ659186.1)及海洋海绵细菌Marine sponge bacterium (EU346455.1)的相对丰度,而提高了(P<0.20)费格森埃希菌Escherichia fergusonii (HQ259962.1)、都柏林克罗诺杆菌Cronobacter dublinensis (HQ880412.1)及Bacterium B81(2011) (HQ674993.1)的相对丰度,有可能是通过这一途径产生促生长效应。
 
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  图1 饲喂赛克灵Saccharomyces cerevisiae J8734对鲫鱼肠道定植菌群结构的影响 (梯度凝胶电泳图)
  Figure 1. Effects of dietary Saccharomyces cerevisiae J8734 on the gut autochthonous bacterial community of crucian carp Carassius auratus (Denaturing Gradient Gel Electrophoresis, DGGE)
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  图2 饲喂赛克灵Saccharomyces cerevisiae J8734鲫鱼肠道定植菌群结构聚类分析图
  Figure 2. Cluster analysis of the gut autochthonous bacterial community of crucian carp Carassius auratus fed Saccharomyces cerevisiae J8734
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    3 结论
  赛克灵2g/kg对鲫鱼促长最为显著,明显提高了鲫鱼的肥满度;
  饲喂赛克灵及同类产品在一定程度上提高了鱼体血清补体C3的水平;
  饲喂赛克灵及同类产品明显改变了鲫鱼定植菌群结构,赛克灵有可能是通过这一途径产生促生长效应。
 
 
 

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